сховати меню

Сравнительная оценка активности составляющих препаратов Полижинакс и Тержинан in vitro

сторінки: 44-46

Отчет об исследовании, проведенном в лаборатории Nosocotech (Лион, Франция), 15 декабря 2011 г.This report concerns the in vitro study of the activity of two antibiotics (neomycin sulfate and polymyxin B sulfate) and one antifungal (nystatin) studied separately, then the activity of their combination in a medicinal product Polygynax®

На сегодняшний день антибактериальная терапия с применением комбинированных антибактериальных препаратов (АБП) показана в следующих клинических ситуациях:

  • при наличии микобактериальной инфекции;
  • инфекций, ассоциированных с синегнойной палочкой;
  • бактериальных инфекций с вероятностью развития резистентности к АБП;
  • в связи с необходимостью расширения спектра действия АБП при лечении тяжелых и микробиологически незадокументированных инфекций (Courvalin et al., 2008).

В данной статье представлены материалы заключительного отчета лабораторного исследования активности двух АБП и одного противогрибкового препарата в отношении 17 видов бактерий и штаммов Candida. Для этого было проведено исследование (ноябрь 2008) с целью оценки антимикробной эффективности комбинаций нескольких действующих веществ на примере лекарственных препаратов, используемых в гинекологической практике. В частности, обзор посвящен исследованию активности двух антибиотиков (неомицина сульфата и полимиксина В сульфата) и одного фунгицидного препарата (нистатина) как в отдельности, так и в комбинации на примере препарата Полижинакс в сравнении с аналогичным препаратом Тержинан различных производителей. Препарат Тержинан, произведенный во Франции (Bouchara-Recordati), содержит комбинацию нистатина и двух антибиотиков (неомицина сульфата и метронидазола). Тержинан российского производства вместо метронидазола содержит тернидазол, и кроме того, в его состав входит глюкокортикоид (преднизолон).

Авторы исследования задались целью оценить эффективность готовых к использованию комбинаций противогрибкового препарата и АБП, используемых в гинекологической практике для местного лечения вагинитов, ассоциированных с чувствительными микроорганизмами, а также для лечения неспецифического вагинита. При бактериальных вагинозах в качестве возбудителей также могут обнаруживаться бактерии (Staphylococcus aureus, Streptococcus B, Escherichia coli, Proteus).

Целью исследования являлось определение эффективности всех трех составляющих лекарственного средства Полижинакс как по отдельности, так и в комбинации. Кроме того, был протестирован другой лекарственный препарат – Тержинан.

Материалы и методы исследования

Эффективность изучаемых препаратов была исследована в отношении следующих штаммов микроорганизмов: Klebsiella pneumoniae, E. coli, Enterobacter aerogenes, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Salmonella enteritidis, Shigella spp., Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus meti-S (MSSA), Staphylococcus aureus meti-R (MRSA), Streptococcus A, Streptococcus B, Enterococcus hirae, Corynebacterium amycolatum, Gardnerella vaginalis. Большинство из этих штаммов бактерий, а также штаммы дрожжей Candida albicans, Candida glabrata были получены из патологических образцов. Исследовали действие антибактериальных и противогрибкового препаратов неомицина сульфата, полимиксина В сульфата и нистатина. Активность комбинации вышеуказанных действующих веществ определялась на примере следующих лекарственных средств.

  • Полижинакс: неомицина сульфат – 35 000 МЕ (51,4 мг), полимиксина В сульфат – 35 000 МЕ (4,6 мг) и нистатин – 100 000 ЕД (17,7 мг).
  • Тержинан (Франция)*: метронидазол – 500 мг, неомицин – 65 000 МЕ (95,5 мг), нистатин – 100 000 ЕД (17,7 мг).
  • Тержинан (Россия)**: тернидазол – 200 мг, неомицин – 65 000 МЕ (95,5 мг), нистатин – 100 000 ЕД (17,7 мг). Кроме того, этот лекарственный препарат содержит глюкокортикоид (3 мг преднизолона).

Минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) определяли при посеве на агар. Серии разведений антибиотиков были помещены в чашки Петри для смешивания с питательной средой. На поверхность агара в каждой чашке Петри были нанесены линии исследуемых штаммов стандартным методом посева. МИК определяли по самой низкой концентрации антибиотика, которая препятствовала видимому росту микроорганизмов в течение одной ночи.

Для определения МИК капсулы и/или таблетки исследуемого препарата растворяли и разбавляли водным раствором соли таким образом, чтобы диапазон концентраций неомицина соответствовал таковым, которые использовались для определения МИК антибиотиков по отдельности.

Одну капсулу Тержинана растворили в 74,3 мл водного раствора соли. Концентрации других антибактериальных веществ были рассчитаны в соответствии с их содержанием в капсулах и/или таблетках.

Тержинан (Франция):

  • конечная концентрация неомицина – 1285 мг/л;
  • конечная концентрации нистатина – 238,2 мг/л;
  • конечная концентрация метронидазола – 6729,5 мг/л.

Тержинан (Россия):

  • конечная концентрация неомицина – 1285 мг/л;
  • конечная концентрации нистатина – 238,2 мг/л;
  • конечная концентрация тернидазола – 2691,8 мг/л.

Диапазоны испытуемых концентраций полимиксина В и неомицина в виде порошка – от 128 до 0,5 мг/л.

Полижинакс:

  • неомицин – 128,5-0,5 мг/л;
  • полимиксин В – 11,5-0,05 мг/л;
  • нистатин – от 44,25-0,18 мг/л.

Тержинан (Франция):

  • неомицин – 128,5-0,5 мг/л;
  • нистатин – 23,8-0,18 мг/л;
  • метронидазол – 673-2,6 мг/л.

Тержинан (Россия):

  • неомицин – 128,5-0,5 мг/л;
  • нистатин – 23,8-0,18 мг/л;
  • тернидазол – 269,2-1,1 мг/л.

Все манипуляции проводились дважды, и значение МИК было указано как высшее из двух полученных.

Результаты исследования

Нами были выявлены критические концентрации чувствительности бактериальных штаммов к антибиотикам в соответствии с определением Французского сообщества микробиологов («Французский комитет по антибиотикограммам», 2008):

  • неомицин ≤ 8 S, > 16 R;
  • полимиксин ≤ 2 S, > 2 R;
  • метронидазол ≤ 4 S, > 16 R.

Неомицин – антибиотик из группы аминогликозидов. Он подавляет синтез белка, вызывает нарушения в транскрипции генетического кода и обусловливает гибель микробных клеток. Как правило, к нему чувствительны аэробные бактерии (C. amycolatum, Listeria и MSSA), что было доказано в эксперименте. Кроме того, определяли чувствительность грамотрицательных бактерий, в т.ч. P. aeruginosa, обычно резистентной к этому антибиотику. В то же время устойчивость MRSA и грамотрицательных кокков (стрептококки и энтерококки) соответствовала изученному спектру действия неомицина.

Полимиксин В относится к группе полипептидных антибиотиков. Его действие направлено на цитоплазматическую мембрану бактериальной клетки. Из испытуемых штаммов только E. coli, K. pneumoniae и Enterobacter оказались к нему чувствительны. В отношении остальных штаммов была выявлена резистентность к препарату. В частности, речь идет о грамположительных бактериях, что соответствует известному спектру действия полимиксина B.

Нистатин – противогрибковый препарат полиенового ряда. Он связывается с эргостеролом, основным компонентом клеточной оболочки грибка, оказывая повреждающее действие на мембрану и приводя к его гибели. Оба испытуемых штамма дрожжей C. albicans и C. glabrata оказались чувствительны к этому противогрибковому препарату. Вместе с тем бактерии были резистентны к нему, что неудивительно, поскольку нистатин не оказывает влияния на прокариотические микроорганизмы.

Метронидазол – производное нитроимидазола. Он действует на анаэробные микроорганизмы (за некоторым исключением), G. vaginalis (которая является факультативным анаэробом) и внутриклеточные паразиты, такие как Trichomonas vaginalis.

Результаты тестирования лекарственных средств (угнетение роста культуры бактерий), представляющих собой комбинации различных антибиотиков, даны в таблице:

Таблица. Сравнительная MИК неомицина, полимиксина и нистатина по отдельности, а также в составе комбинированных лекарственных форм (Полижинакс, Тержинан [французского и российского производства]).
Возбудитель
Монопрепараты
Комбинированные препараты
Неомицин
Полимиксин B
Нистатин
Полижинакс
(неомицин/нистатин/полимиксин В)
Тержинан (Франция)
(неомицин/нистатин/метронидазол)
Тержинан (Россия)
(неомицин/нистатин/тернидазол)
K. pneumoniae
4 S
2 S
>128 R
4/0,36/.
S
4/./21
S
2/./4,2
S
E. coli
4 S
2 S
>128 R
4/0,36/.
S
4/./21
S
2/./4,2
S
E. aerogenes
2 S
1 S
>128 R
2/0,18/.
S
4/./21
S
4/./8,41
S
P. mirabilis
2 S
>128 R
>128 R
16,1/1,44/.
S
8/./42
S
8/./16,83
S
P. vulgaris
2 S
64 R
>128 R
16,1/1,44/.
S
8/./42
S
8/./16,83
S
S. enteritidis
1 S
8 R
>128 R
16,1/1,44/.
S
8/./42
S
8/./16,83
S
Shigella
4 S
1 S
>128 R
1/0,09/.
S
0,5/./2,6
S
4/./8,41
S
P. aeruginosa
8 S
4 R
>128 R
16,1/1,44/.
S
8/./42
S
8/./16,83
S
S. aureus (MSSA)
2 S
>128 R
>128 R
4/0,36/.
S
128,5/./673
S
128,5/./269,2
S
S. aureus (MRSA)
16 R
64 R
>128 R
32,1/2,88/.
R
>128,5/./673
R
>128,5/./269,2
R
Streptococcus A
128 R
128 R
>128 R
128,5/11,5/.
R
128,5/./673
R
128,5/./269,2
R
Streptococcus B
128 R
128 R
>128 R
128,5/11,5/.
R
128,5/./673
R
128,5/./269,2
R
E. hirae
64 R
>128 R
>128 R
128,5/11,5/.
R
64,3/./336,5
R
64,3/./134,6
R
C. amycolatum
0,5 S
16 R
>128 R
<0,5/0,05/.
S
<0,5/./2,6
S
<0,5/./2,6
S
C. albicans
R
R
2 S
./5,53/.
S
./1,5/.
S
./1,5/.
S
C. glabrata
R
R
1 S
./1,38/.
S
./0,75/.
S
./0,75/.
S
G. vaginalis
8 S
16 R
>128 R
32,1/2,88/.
R
4/./21
S
4/./8,41
S

. В случае, когда концентрация комплексных препаратов была ниже, чем МИК одного из АБП – штамм считался чувствительным к комбинации всех трех АБП (отмечено зеленым цветом). В противном случае штамм считался резистентным (отмечено красным цветом).

 

Антибактериальный спектр Полижинакса соответствовал таковому для неомицина, полимиксина и нистатина по отдельности. Кроме того, был определен пороговый уровень чувствительности G. vaginalis к неомицину и резистентность к полимиксину B. При тестировании Полижинакса в двух экспериментах отмечался пороговый уровень эффективности: в одном доказана эффективность, в другом – не выявлено противомикробной активности. Также не отмечено ни синергического, ни антагонистического действия в отношении трех компонентов препарата Полижинакс.

Спектр действия Тержинана (как французского, так и российского производства) был таким же, как и препарата Полижинакс, за исключением того, что первый оказался более активен в отношении G. vaginalis. Результаты исследования показали, что S. aureus (MRSA), стрептококки и энтерококки нечувствительны к Тержинану.

Выводы

Определяемые в нашем исследовании MИК являются только теоретическими, однако они позволяют продемонстрировать спектр действия антибиотиков в отношении разных штаммов бактерий как по отдельности, так и в комбинации. Результаты исследования соответствуют ранее опубликованным данным литературы.

  • Неомицин действует преимущественно на грамотрицательные бактерии и не влияет на грамположительные, кроме метициллинчувствительных стафилококков и C. amycolatum. Он также активен в отношении G. vaginalis.
  • Полимиксин В проявляет активность относительно грамотрицательных бактерий, таких как K. pneumoniae, E. coli, E. aerogenes и Shigella spp. Он не оказывает действия на грамположительные микроорганизмы, так как воздействует только на наружную мембрану клетки.
  • Нистатин действует только на эукариоты (дрожжи, такие как C. albicans и C. glabrata).

Кроме того, МИК, определяемые в нашем исследовании, демонстрируют комбинированное действие антибиотиков в их оригинальной концентрации в составе комплексного лекарственного препарата.

Полижинакс. Спектр действия препарата Полижинакс соответствует активности действующих веществ в его составе. Прежде всего, речь идет о неомицине, который активен в отношении S. aureus (MSSA), Streptococcus, Enterococcus, а также грибов рода Candida.

Тержинан. Антибактериальный спектр действия препаратов Тержинан (Россия) и Тержинан (Франция) несколько отличается. Это объясняется наличием метронидазола в составе препарата французского производства или тернидазола российского производства. Оба препарата показали высокую активность в отношении G. vaginalis. В отношении T. vaginalis исследования не проводились. Спектр действия Полижинакса идентичен Тержинану, за исключением того, что не выявлено действия Тержинана на S. aureus, стрептококки и энтерококки. Последний оказался более активным в отношении G. vaginalis.

Полученные результаты продемонстрировали, что концентрации действующих веществ в препаратах для местной терапии (но не для перорального приема) выше токсических концентраций, определяющих развитие резистентности к антибактериальному компоненту. При таких условиях возможно, что штаммы возбудителя, теоретически устойчивые к действующему веществу, будут подавляться его высокими концентрациями. Кроме того, существует вероятность того, что эти высокие концентрации могут оказывать синергичное влияние на возбудителя, которое по спектру действия более широкое, нежели у каждого действующего вещества по отдельности.

* По требованию Французского агентства по безопасности лекарственных средств (AFSAPS) на территории Европы препарат Тержинан зарегистрирован в составе: неомицин, нистатин, метронидазол без гормонального компонента – преднизолона. Vidal (Франция), 2012 г.
** Описание состава лекарственного препарата Тержинан основано на официально утвержденной инструкции по применению препарата Тержинан на территории России для специалистов и утверждено компанией-производителем для издания Vidal (Россия), 2011 г. В состав входят: неомицин, нистатин, тернидазол, преднизолон.

Наш журнал
у соцмережах:

Випуски за 2012 Рік

Випуски поточного року

Зміст випуску 2 (131), 2020

  1. О. В. Дженина, В. Ю. Богачев, А. Л. Боданская

  2. В.І. Пирогова

  3. М.В. Медведєв

  4. М. В. Майоров, С. В. Ворощук, Е. А. Жуперкова, С. И. Жученко, О. Л. Черняк

  5. І. В. Лахно, А. Е. Ткачов

  6. Ю. В. Лавренюк, П. Л. Шупика, М. В. Лоншакова

  7. С. П. Пасєчніков, П. О. Самчук

  8. R. Eastell, C. J. Rosen, D. M. Black, A. M. Cheung, M. H. Murad, D. Shoback