Исследование чувствительности in vitro 200 клинических изолятов Candida spp. к местным антимикотикам, используемым для лечения вульвовагинального кандидоза: имидазольным препаратам и нистатину

Местные антимикотики широко рекомендуются для лечения вульвовагинального кандидоза (ВВК). Наиболее часто назначаемые местные антимикотики – имидазолы клотримазол, миконазол, эконазол и полиен нистатин – представлены на фармацевтическом рынке на протяжении уже более 30 лет. Имеется очень мало новых данных о чувствительности к вышеуказанным антимикотикам различных видов Candida, особенно non-albicans штаммов, которые, по-видимому, менее восприимчивы к лечению имидазолами. Цель исследования заключалась в определении в условиях in vitro чувствительности большого количества недавно выделенных клинических изолятов Candida spp. к наиболее часто назначаемым местным антимикотикам.

Исследование на чувствительность к антимикотикам было проведено с использованием метода микроразведения в бульоне в соответствии с протоколом M27-A3 Института клинических и лабораторных стандартов США (Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI). Также были определены минимальные ингибирующие концентрации (МИК) для эконазола, миконазола, клотримазола и нистатина. Клинические изоляты включали: Candida albicans – 113 штаммов, Candida glabrata – 54 штамма, Candida krusei, Candida tropicalis и Candida parapsilosis – по 11 штаммов каждого вида. МИК90 трех азольных препаратов по отношению к изолятам C. albicans составила 0,06 мг/л, в то время как МИК90 нистатина – 4 мг/л. Значения МИК90 в отношении изолятов Candida non-albicans колебались в диапазонах 0,5-8; 1-4 и 0,12-4 мг/л для эконазола, миконазола и клотримазола соответственно. Показатель МИК90 нистатина оставался на уровне 4 мг/л для всех протестированных видов Candida non-albicans.

Результаты данного исследования подтверждают восприимчивость C. albicans к наиболее часто применяемым местным антимикотикам и могут служить аргументом в пользу лечения вульвовагинального кандидоза, вызванного разновидностями Candida non-albicans, с помощью альтернативных имидазолу лекарственных средств, таких как нистатин.

Ключевые слова: вульвовагинальный кандидоз, Candida spp., местные имидазольные препараты, нистатин.

ВВК – это вторая наиболее распространенная причина вагинита после бактериального вагиноза, ежегодно поражающая миллионы женщин по всему миру [12, 25]. Данную инфекцию диагностируют у 70-75 % женщин всех возрастов как минимум один раз в течение жизни, у 40-45 % – два и более раз [7, 25].

В 85-95 % случаев причиной ВВК являются дрожжеподобные грибы вида Candida albicans [25], в остальных – штаммы Candida non-albicans, главным образом Candida glabrata [4, 18].

Согласно результатам некоторых исследований, ВВК, вызванный Candida non-albicans, становится все более распространенным [6, 29, 30]. Рост заболеваемости может быть обусловлен различными причинами, в т.ч. чрезмерным применением противогрибковых препаратов, продаваемых без рецепта, лечением однократной дозой, низкодозированными азолами [22] или увеличением количества пациенток высокого риска (например с диабетом и ВИЧ-инфекцией) [7, 29]. Тем не менее в других исследованиях не подтверждено предположение о том, что учащение случаев ВВК вызвано Candida non-albicans [26, 28].

На основании клинических проявлений, микробиологических показателей, индивидуальных факторов и результатов лечения ВВК можно классифицировать как неосложненный (около 90 % случаев) и осложненный (приблизительно 10 %) [7]. Неосложненный ВВК обычно вызывают C. albicans; лечение проводят различными местными или пероральными антимикотиками, в т.ч. нистатином и азолами. Азольные препараты для внутривагинального (имидазолы) или пер­орального применения часто рекомендуют как первоочередные средства лечения [7, 17, 31]. Некоторые исследования показали, что более 90 % случаев неосложненного ВВК можно вылечить при помощи разовой дозы азольного препарата для перорального применения или короткого курса местной терапии имидазолом [17, 23, 31]. Данные, свидетельствующие о преимуществе одного препарата по сравнению с другим для местного применения, отсутствуют [19, 24].

Осложненный ВВК может быть определен как острая или рецидивирующая инфекция, вызванная видами дрожжеподобных грибов Candida, не относящимися к C. аlbicans, и/или как следствие различных нарушений в организме женщины (например неконтролируемого диабета, истощения, иммунодепрессии) [7]. Оптимальное лечение осложненного ВВК до сих пор остается неизвестным. Тем не менее его обычно проводят при помощи многократного приема азольных препаратов или длительного курса местной терапии имидазолами [17]. Результаты некоторых исследований свидетельствуют, что осложненный ВВК, вызванный non-albicans штаммами, трудно купировать препаратами на основе имидазола вследствие сниженной восприимчивости микроорганизмов к данному классу антимикотиков [10, 14, 16, 21, 22]. Полиен нистатин был предложен как альтернатива имидазолам для лечения осложненного ВВК, вызванного non-albicans видами. Нистатин известен как высокоэффективное средство лечения инфекций, обусловленных грибами Candida spp. Он рекомендован европейскими нормативными документами в качестве первой линии терапии хронического ВВК, вызванного C. glabrata [23].

Наиболее часто для лечения ВВК назначаются имидазольные противогрибковые препараты (клотримазол, миконазол, эконазол), а также полиен нистатин. Так как эти лекарственные средства доступны на рынке уже более 30 лет, со временем эффективность их противогрибкового действия могла измениться. По нашим сведениям, новые данные об эффективности in vitro этих местных антимикотиков против различных видов Candida весьма немногочисленны. Таким образом, в данном исследовании мы хотели изучить чувствительность in vitro множественнных недавно выделенных клинических изолятов Candida spp. (а именно albicans иnon-albicans штаммов) к клотримазолу, миконазолу, эконазолу и нистатину.

Материалы и методы исследования

вверх

Изоляты дрожжевых грибов рода Candida

Две сотни клинических изолятов дрожжевых грибов рода Candida, большинство из которых являлись вагинальными изолятами, были получены в лаборатории микробиологии института Альфреда Фурнье и в Европейском госпитале имени Жоржа Помпиду с сентября 2008 по апрель 2011 г. (табл.).

Идентификация видов Candida была осуществлена с помощью исследования структуры колонии в хромогенной среде (ChromID™ Candida; Биомерье, Франция) после 24-48 ч инкубации при температуре 35 °С с использованием стандартной системы (стрипы API^® Candida; Биомерье, Франция).

Чтобы гарантировать чистоту и жизнеспособность, замороженные клетки изолятов дрожжей засеяли на агар Сабуро с декстрозой и хлорамфениколом и инкубировали при температуре 35 °С на протяжении 24 ч. Эту процедуру повторили дважды, перед тем как провести тестирование на чувствительность к антимикотикам.

Антимикотические препараты

Были исследованы следующие местные антимикотики: азолы – эконазол, миконазол и клотримазол (Sigma, Сен-Кантен Фаллавье, Франция) и полиен нистатин (Sigma). Поскольку все они не растворяются в воде, их растворили в диметилсульфоксиде (DMSO; Sigma). Из каждого испытуемого препарата были приготовлены двукратные серийные разведения с конечной концентрацией микроорганизмов в диапазоне от 32 до 0,06 мг/л для нистатина и от 8 до 0,015 мг/л для эконазола, миконазола и клотримазола.

Тестирование на чувствительность к антимикотикам

Тестирование на чувствительность к антимикотикам проводили с помощью метода микроразведения в бульоне на основании протокола CLSI М27-АЗ [8] с применением питательной среды с глутамином, без бикарбоната (раствор RPM11640; Sigma). В качестве буферного раствора была использована 3- (N-морфолино) пропансульфоновая кислота (MOPS: Sigma) с показателем pH 7,0 и конечной концентрацией 0,165 моль/л.

Задаточные дрожжи были приготовлены путем отбора колоний из культур возрастом 24 ч и помещения их в 5 мл стерильного физиологического раствора (0,85 % NaCl). Плотность клеток в полученной суспензии была отрегулирована до стандарта мутности по МакФарланду 0,5, что соответствовало 1× 10⁶-5 × 10⁶ КОЕ/мл. Затем суспензия была дважды растворена: сначала стерилизованной водой 1:20, а затем раствором RPMI 1:50, чтобы получить 1 × 10³-5 × 10³ КОЕ/мл. Впоследствии 100 мкл этого посевного раствора и 100 мкл противогрибкового (с рабочей концентрацией в два раза выше, чем необходимая конечная концентрация) были засеяны в U-образные ячейки стерильных одноразовых 96-луночных плашек. В каждой плашке конечная концентрация посевного материала составляла 0,5 × 10³-2,5 × 10³ КОЕ/мл. В каждую микроплашку была добавлена отрицательная контрольная проба (среда без посевного материала) и положительная контрольная проба (посевной материал без антимикотика).

Плашки инкубировали при температуре 37 °С, МИК была определена визуально через 48 ч с помощью сравнения роста в плашках с противогрибковым раствором и с положительной контрольной пробой.

МИК нистатина, вызвавшая полное ингибирование роста, была наиболее низкой (как рекомендовано для других полиенов, например амфотерицина В), а у эконазола, миконазола и клотримазола таковая обусловила приблизительно 50 % сокращение роста по сравнению с ростом в плашке с положительной контрольной пробой (как рекомендовано для других азольных препаратов, например флуконазола). Контроль качества был обеспечен посредством тестирования контрольных штаммов С. parapsilosis АТСС 22019 и С. krusei АТСС 6258 в соответствии с рекомендациями по контролю качества Института клинических и лабораторных стандартов США.

Результаты исследования и их обсуждение

вверх

Всего было протестировано 113 изолятов С. al­bi­cans и 87 изолятов C. non-albicans (54 С. glabrata, 11 С. krusei, 11 С. tropicalis и 11 С. parapsilosis) для определения их чувствительности in vitro к каждому антимикотику.

Результаты представлены по показателям МИК, подавляющей рост 50 % изолятов (МИК₅₀); МИК, подавляющей рост 90 % изолятов (МИК₉₀), и по диапазону значений МИК (от минимального до максимального значения) для всех видов Candida и антимикотиков (табл.). В целом полученные данные свидетельствуют, что три азольных препарата были особенно эффективны против С. albicans и в меньшей степени против других видов Candida. Так, МИК₉₀ эконазола была самой низкой для С. albicans (0,06 мг/л), затем следовали показатели С. glabrata (0,5 мг/л, т.е. в 8 раз выше), С. tropicalis (1 мг/л, в 16 раз выше), С. parapsilosis (2 мг/л, в 33 раза выше) и С. krusei (8 мг/л, в 133 раза выше). Аналогично МИК₉₀ клотримазола была самой низкой для С. albicans (0,06 мг/л), далее следовали показатели С. parapsilosis (0,12 мг/л, т.е. в 2 раза выше), С. tropicalis (0,25 мг/л, т.е. в 4 раза выше), С. krusei (0,5 мг/л, т.е. в 8 раз выше) и С. glabrata (4 мг/л, т.е. в 67 раз выше). МИК₉₀ миконазола была самой низкой для С. albicans (0,06 мг/л), далее следовали показатели С. glabrata (1 мг/л, т.е. в 17 раз выше), С. tropicalis (2 мг/л, т.е. в 33 раза выше), С. krusei и С. parapsilosis (4 мг/л для обоих, т.е. в 67 раз выше).

МИК₉₀ нистатина была одинаковой для С. al­bicans и других протестированных видов C. non-albicans (4 мг/л).

Результаты контроля качества штамма были воспроизводимыми, однако не было пограничных значений согласно стандартам CLSI для данных штаммов с протестированными антимикотиками.

В этом исследовании мы изучали активность in vitro эконазола, миконазола, клотримазола и нистатина против недавно выделенных клинических изолятов Candida сцелью получения новых данных о любых возможных изменениях МИК, в частности по отношению к видам C. non-albicans. В соответствии с предыдущими данными [19, 24], результаты нашего исследования подтверждают, что все три имидазольные препараты обладают аналогичной и весьма значительной активностью против недавно выделенных изолятов С. albicans (МИК₉₀ 0,06 мг/л). Кроме того, полиен нистатин продемонстрировал значительную противогрибковую активность (полное ингибирование) в отношении С. albicans, хотя и с более высоким значением МИК₉₀ по сравнению с МИК₉₀, наблюдаемой у азолов (4 мг/л).

Противогрибковая активность азольных препаратов была менее выраженной против non-albicans штаммов в сравнении с действием против С. albicans, что подтверждается более высоким показателем МИК₉₀ (в 2-133 раза выше). В отличие от этого противогрибковая активность нистатина против всех видов Candida была аналогичной (значение МИК₉₀ составило 4 мг/л в отношении видов как albicans, так и non-albicans). Для С. glabrata наиболее низкие показатели МИК₉₀ наблюдались при воздействии на нее эконазола (0,5 мг/л), а для других видов non-albicans – C. krusei, C. tropicalis и C. parapsilosis – самые низкие значения МИК₉₀ выявлялись при воздействии клотримазола (0,5; 0,25 и 0,12 мг/л соответственно). Следует отметить, что различие показателей МИК для имидазольных препаратов и нистатина может быть связано с различными механизмами действия этих двух классов антимикотиков. Имидазолы меняют проницаемость клеточной оболочки чувствительных к ним дрожжевых грибов путем ингибирования фермента ланостерол-14-альфа-деметилазы. При этом блокируется биосинтез эргостерола, который является составной частью клеточной мембраны грибов. Полиен нистатин взаимодействует с эргостеролом и образует каналы, через которые жизненно важные цитоплазматические компоненты выходят из внутренней части грибковой клетки наружу, что приводит к гибели микроорганизма [15]. Кроме того, более низкие показатели МИК₉₀ не обязательно коррелируют с более высокой эффективностью, даже при сравнении препаратов, принадлежащих к одному классу [8].

Результаты нашего исследования согласуются с предыдущими клиническими данными, свидетельствующими о том, что имидазольные препараты обладают невысокой степенью эффективности при ВВК, вызванном видами C. non-albicans [14, 16, 21, 22]. Кроме того, они соответствуют результатам предыдущих исследований чувствительности in vitro видов C. albicans и C. non-albicans к нистатину с применением метода CLSI [2, 3, 5, 11, 22]. Действительно, показатели МИК₉₀, наблюдаемые в ходе предыдущих исследований, были почти аналогичны значению 4 мг/л, выявленному во время проведения нашего исследования. S. S. Richter et al. было изучено большое количество вагинальных штаммов Candida (582 из тех же пяти видов, которые были оценены в ходе нашего исследования), в результате чего для всех видов было получено такое же значение МИК₉₀ для нистатина – 4 мг/л [22]. Поэтому несмотря на то что нистатин уже более 40 лет применяется для лечения ВВК, он является эффективным препаратом и в настоящее время.

Следует учитывать тот факт, что хотя исследования чувствительности к антимикотикам in vitro могут стать полезным инструментом для прогнозирования терапевтического эффекта, они не всегда правильно отображают то, что происходит in vivo вследствие индивидуальной вариабельности, характеристик препарата, а также вариабельного поведения микроорганизмов в каждом отдельном случае [9, 13, 20, 27]. Важно также отметить, что для интерпретации результатов активности антимикотиков против различных видов Candida необходимы клинические пограничные показатели. В нашем исследовании пограничных показателей CLSI в отношении протестированных местных антимикотиков не было и поэтому отсутствовали критерии интерпретации резистентности. Тем не менее наши данные свидетельствуют, что все протестированные антимикотики обладают надлежащей активностью против изолятов Candida spp. с широким диапазоном значений МИК (от 0,015 до 8 мг/л) в зависимости от вида.

Выводы

вверх

В заключение следует отметить, что результаты данного исследования in vitro подтверждают стойкую чувствительность C. albicans к наиболее часто применяемым местным антимикотикам и могут служить аргументом в пользу лечения ВВК, вызванного разновидностями Candida non-albicans, с помощью лекарственных препаратов, альтернативных имидазолам, таких как нистатин. Использование нистатина может иметь особое значение для женщин, пораженных C. non-albicans с более высоким уровнем резистентности к широко используемым препаратам на основе имидазола [1].

Целесообразно провести сравнительное клиническое исследование, чтобы сопоставить стабильный показатель МИК нистатина и повышенные МИК эконазола, миконазола и клотримазола с успехом или неудачей в лечении пациенток с ВВК.

Список использованной литературы

вверх1. Achkar J. M., Fries B. C. Candida infections of the genitourinary tract. Clin Microbiol Rev 2010; 23: 253-73.

2. Blignaut E., Messer S., Hollis R. J., Pfaller M. A. Antifungal susceptibility of South African oral yeast isolates from HIV/AIDS patients and healthy individuals. Diagn Microbiol Infect Dis 2002; 44: 169-74.

3. Brito G. N., Inocencio A. C., Querido S. M., Jorge A. O., Koga-Ito C. Y. In vitro antifungal susceptibility of Candida spP. oral isolates from HIV-positive patients and control individuals. Braz Oral Res 2010; 25: 28-33.

4. Buscemi L., Arechavala A., Negroni R. Study of acute vulvovaginitis in sexually active adult women, with special reference to candidosis, in patients of the Francisco J Muniz Infectious Diseases Hospital. Rev Iberoam Micol 2004; 21: 177-81.

5. Carrillo-Munoz A. J., Quindos G., Tur C., Ruesga M. T., Miranda Y., del Valle O. et al. In vitro antifungal activity of liposomal nystatin in comparison with nystatin, amphotericin B cholesteryl sulphate, liposomal amphotericin B, amphotericin B lipid complex, amphotericin B desoxycholate, fluconazole and itraconazole. J Antimicrob Chemother 1999; 44: 397-401.

6. Cauwenbergh G. Vaginal candidiasis: evolving trends in the incidence and treatment of non-Candida albicans infection. Curr Probl Obstet Gynecol Fertil 1990; 8:241.

7. CDC, MMWR. Vulvovaginal candidiasis. Sexually transmitted diseases treatment guidelines 2010, vol. 5. 2010; P. 61-3.

8. Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI). Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts; approved standard M27-A3, 3rd ed., PA: CLSI; 2008.

9. Dalben-Dota K. F., Faria M. G., Bruschi M. L., Pelloso S. M., Lopes-Consolaro M. E., Svidzinski T. I. Antifungal activity of propolis extract against yeasts isolated from vaginal exudates. J Altern Complement Med 2010; 16: 285-90.

10. Donders G. G. G., Bellen G., Mendling W. Management of recurrent vulvovaginal candidosis as a chronic illness. Gynecol Obstet Invest 2010; 70: 306-21.

11. Dota K. F., Consolaro M. E., Svidzinski T. I., Bruschi M. L. Antifungal activity of Brazilian propolis microparticles against yeasts isolated from vulvovaginal candidiasis. Evid Based Complement AlternatMed 2011 [ID201953].

12. Eckert L. O. Clinical practice. Acute vulvovaginitis. N Engl J Med 2006; 355:1244-52.

13. Fan S. R., Liu X. P., Li J. W. Clinical characteristics of vulvovaginal candidiasis and antifungal susceptibilities of Candida species isolates among patients in southern China from 2003 to 2006. J Obstet Gynaecol Res 2008; 34: 561-6.

14. Fidel Jr P. L., Vazquez J. A., Sobel J. D. Candida glabrata: review of epidemiology, pathogenesis, and clinical disease with comparison to C. albicans. Clin Microbiol Rev 1999; 12: 80-96.

15. Ghannoum M. A., Rice L. B. Antifungal agents: mode of action, mechanisms of resistance, and correlation of these mechanisms with bacterial resistance. Clin Microbiol Rev 1999; 12: 501-17.

16. Lynch M. E., Sobel J. D. Comparative in vitro activity of antimycotic agents against pathogenic vaginal yeast isolates. J Med Vet Mycol 1994; 32: 267-74.

17. Pappas P. G., Kauffman C. A., Andes D., Benjamin Jr D. K., Calandra T. F., Edwards Jr J. E. et al. Clinical practice guidelines for the management of candidiasis: 2009 update by the Infectious Diseases Society of America. Clin Infect Dis 2009; 48: 503-35.

18. Paulitsch A., Weger W., Ginter-Hanselmayer G., Marth E., Buzina W. A 5-year (2000-2004) epidemiological survey of Candida and non-Candida yeast species causing vulvovaginal candidiasis in Graz Austria. Mycoses 2006; 49: 471-5.

19. Reef S. E., Levine W. C., McNeil M. M., Fisher-Hoch S., Holmberg S. D., Duerr A. et al. Treatment options for vulvovaginal candidiasis, 1993. Clin Infect Dis 1995; 20: S80-90.

20. Rex J. H., Pfaller M. A., Walsh T. J., Chaturvedi V., Espinel-Ingroff A., Ghannoum M. A. et al. Antifungal susceptibility testing: practical aspects and current challenges. Clin Microbiol Rev 2001; 14: 643-58.

21. Ribeiro M. A., Dietze R., Paula C. R., Da Matta D. A., Colombo A. L. Susceptibility profile of vaginal yeast isolates from Brazil. Mycopathologia 2001; 151: 5-10.

22. Richter S. S., Galask R. P., Messer S. A., Hollis R. J., Diekema D. J., Pfaller M. A. Antifungal susceptibilities of Candida species causing vulvovaginitis and epidemiology of recurrent cases. J Clin Microbiol 2005; 43: 2155-62.

23. Sherrard J., Donders G., White D., Jensen J. S. European (IUSTI/WHO) guideline on the management of vaginal discharge, 2011. Int J STD AIDS 2011;: 421-9.

24. Sobel J. D. Vaginitis. New Engl J Med 1997; 337: 1896-903.

25. Sobel J. D. Vulvovaginal candidosis. Lancet 2007; 369: 1961-71.

26. Sobel J. D., Brooker D., Stein G. E., Thomason J. L., Wermeling D. P., Bradley B. et al. Single oral dose fluconazole compared with conventional clotrimazole topical therapy of Candida vaginitis. Fluconazole Vaginitis Study GrouP. Am J Obstet Gynecol 1995; 172: 1263-8.

27. Sobel J. D., Zervos M., Reed B. D., Hooton T., Soper D., Nyirjesy P. et al. Fluconazole susceptibility of vaginal isolates obtained from women with complicated Candida vaginitis: clinical implications. Antimicrob Agents Chemother 2003; 47: 34-8.

28. Sobel J. D., Wiesenfeld H. C., Martens M., Danna P., Hooton T. M., Rompalo A. et al. Maintenance fluconazole therapy for recurrent vulvovaginal candidiasis. N Engl J Med 2004; 351: 876-83.

29. Spinillo A., Capuzzo E., Gulminetti R., Marone P., Colonna L., Piazzi G. Prevalence of and risk factors for fungal vaginitis caused by non-albicans species. Am J Obstet Gynecol 1997; 176: 138-41.

30. Vermitsky J. P., Self M. J., Chadwick S. G., Trama J. P., Adelson M. E., Mordechai E. et al. Survey of vaginal-flora Candida species isolates from women of different age groups by use of species-specific PCR detection. J Clin Microbiol 2008; 46:1501-3.

31. Watson M. C., Grimshaw J. M., Bond C. M., Mollison J., Ludbrook A. Oral versus intravaginal imidazole and triazole antifungal agents for the treatment of uncomplicated vulvovaginal candidiasis (thrush): a systematic review. BJOG 2002; 109: 85-95.

Дослідження чутливості in vitro 200 нещодавно виділених клінічних ізолятів Candida spp. до місцевих антимікотиків, які використовуються для лікування кандидозу: імідазольним препаратам і ністатину

Ф. Шукрі, M. Бендердуш, П. Седнауї

Місцеві антимікотики широко рекомендовано для лікування вульвовагінального кандидозу (ВВК). Місцеві антимікотики, які найбільш часто призначають – імідазоли клотримазол, міконазол, еконазол і полієн ністатин – представлено на фармацевтичному ринку протягом уже понад 30 років. Існує недостатньо нових даних про чутливість до вище­вказаних антимікотиків різних видів Candida, особливо non-albicans штамів, які, очевидно, менш сприйнятливі до лікування імідазолами. Мета дослідження полягала у визначенні в умовах in vitro чутливості великої кількості нещодавно виділених клінічних ізолятів Candida spp. до місцевих антимікотиків, які найбільш часто призначають.

Дослідження на чутливість до антимікотиків було проведено з використанням методу мікророзведень в бульйоні відповідно до протоколу M27-A3 Інституту клінічних і лабораторних стандартів США (Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI). Також було визначено мінімальні інгібуючі концентрації (МІК) для еконазолу, міконазолу, клотримазолу та ністатину. Клінічні ізоляти включали: Candida albicans – 113 штамів, Candida glabrata – 54 штами, Candida krusei, Candida tropicalis і Candida parapsilosis – по 11 штамів кожного виду. МІК₉₀ трьох азольних препаратів по відношенню до ізолятів C. albicans становила 0,06 г/л, у той час як МІК₉₀ ністатину – 4 мг/л. Значення МІК₉₀ щодо ізолятів Candida non-albicans коливалися в діапазонах 0,5-8; 1-4 і 0,12-4 мг/л для еконазолу, міконазолу і клотримазолу відповідно. Показник МІК₉₀ ністатину залишався на рівні 4 мг/л для всіх протестованих видів Candida non-albicans.

Результати даного дослідження підтверджують чутливість C. albicans до найбільш часто вживаних місцевих антимікотиків і можуть служити аргументом на користь лікування ВВК, викликаного різновидами Candida non-albicans, за допомогою альтернативних імідазолу лікарських засобів, таких як ністатин.

Ключові слова: вульвовагінальний кандидоз, Candida spp., місцеві імідазольні препарати, ністатин.

In vitro susceptibility profile of 200 recent clinical isolates of Candida spp. to topical antifungal treatments of vulvovaginal candidiasis, the imidazoles and nystatin agents

F. Choukri, M. Benderdouche, P. Sednaoui

Topical antifungal treatment of vulvovaginal candidiasis is widely recommended. The most commonly recommended topical antifungals (the imidazoles clotrimazole, miconazole and econazole and the polyene nystatin) have been on the market for more than 30 years. There are only a few recent data available on the susceptibility of different Candida species to these antifungals, especially of non-albicans Candida species which appear to be less responsive to treatment with imidazoles. The study aimed to determine the in vitro susceptibility profile of a large number of recent clinical isolates of Candida spp. to the most commonly recommended topical antifungals. An antifungal susceptibility test was performed according to the CLSI M27-A3 broth microdilution method, and minimal inhibitory concentrations were deter-mined for econazole, miconazole, clotrimazole and nystatin.

The clinical isolates comprised of: 113 Candida albicans, 54 Candida glabrata, 11 Candida krusei, 11 Candida tropicalis and 11 Candida parapsilosis. The three azoles agents exhibited MIC₉₀ values of 0.06 mg/L against C. albicans isolates, while nystatin exhibited a MIC₉₀ of 4 mg/L. For non-albicans Candida isolates, MIC₉₀ values ranged from 0.5 to 8 mg/L, from 1 to 4 mg/L and from 0.12 to 4 mg/L, for econazole, miconazole, clotrimazole, respectively. Nystatin MIC₉₀ remained at 4 mg/L for all non-albicans Candida species tested. These results confirmed the susceptibility of C. albicans to the most frequently used topical agents and may support the use of alternative agents to imidazoles, such as nystatin, to treat vulvovaginal candidiasis caused by non-albicans Candida species.

Keywords: vulvovaginal candidiasis, Candida spp., topical imidazole agents, nystatin.